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亲和层析中的蛋白洗脱亲和层析是根据一种生物分子间的特异相互作用来分离物质的层析方法，利用待分离物质与配体间所具有的特异性亲和力来达到分离目的的一类特殊层析技术。如抗原与抗体、DNA与RNA、酶与底物或抑制物等。从亲和层析填料上洗脱结合靶标是结合的可逆过程，需优化条件，削弱靶标和配基之间的相互作用。洗脱条件不应使靶蛋白变性，除非这些条件与下游程序兼容。有两种类型的洗脱方法，即特异性洗脱和非特异性洗脱。特异性洗脱过程中，介质或竞争配基或竞争靶标，通过这种形式攻击蛋白质-配基复合物，继而将靶蛋白释放至...
1-27 2022
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带你走近月旭离子交换以及HILIC分析柱哈喽哈喽，各位亲爱的读者朋友们，大家好呀。好久不见，小编甚是想念大家，不知道大家有没有想小编呢！今天小编将会给大家带来我们月旭两大核心液相色谱柱-离子交换以及亲水分析柱介绍。主要从键合相类型，耐受PH范围，色谱柱具有的特点来带大家走近我们这两大核心色谱柱。离子交换色谱的原理离子交换色谱是指离子交换色谱中的固定相中的一些带电荷的基团，这些带电基团通过静电相互作用与带相反电荷的离子结合。如果流动相中存在其他带相反电荷的离子，按照质量作用定律，这些离子将与结合在固定相上带相反电荷的...
1-26 2022
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如何更好的使用高效液相色谱柱，延长柱寿命？高效液相色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70bar时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板，取决于填料粒度，目的是防止填料漏出。高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（...
1-22 2022
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His标签与IMAC配基IMAC重要的应用是纯化His标记重组蛋白，融合表达的His标签为含有6个或更多组氨酸残基的片段。His标签具有相当高的亲和力和特异性，因此在大多数情况下，IMAC一步纯化足以制备一定纯度的目标蛋白质，且可满足很多应用的要求。标签的结构（即位置、顺序和长度）可以从多个水平影响蛋白质生产：表达率、与IMAC配基的结合能力、蛋白质三维结构、蛋白质晶体的形成等，而且其虽然对溶解度和活性影响轻微，但也有一定作用。His标签常见的形式是由6个连续的组氨酸残基组成，可以提供6个金属结合位...
1-21 2022
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凝胶过滤色谱中的琼脂糖凝胶琼脂糖凝胶简介基于凝胶过滤色谱的原理，对其介质的最基本的要求是不能与原料组分发生除排阻之外的任何其他相互作用，如电荷作用、化学作用、生物学作用等。理想的凝胶过滤介质具有高物理强度及化学稳定性，能够耐受高温高压和强酸强碱，具有高化学惰性，内孔径分布范围窄，珠粒状颗粒大小均一度高。目前常用的有葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等。琼脂糖凝胶来源于一种海藻多糖琼脂，是一种天然凝胶，不是共价交联，所以氢键交联的键能比较弱。它与葡聚糖不同，孔隙度是以改变琼脂糖浓度而达到的。琼脂糖凝...
1-20 2022
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蛋白结合的解离常数以及在蛋白检测和亲和分离中的应用蛋白与配体能否结合、结合的强弱会直接影响蛋白检测或纯化实验的成败。此篇文章由月旭科技首xi科学家王国斌博士执笔，对蛋白结合和解离常数进行了较为系统的讲述。蛋白和配体结合的强弱不同，对于蛋白检测以及亲和分离纯化实验有显著影响。在设计实验时应考虑这种结合强弱影响，以便采用合适的蛋白或配体浓度（包括zui低检测限浓度），估算结合时间，获得最佳并且实用的结果。这对于室温下易失去活性，或希望尽可能保持最高活性蛋白的纯化尤为重要。常规的蛋白检测方法，比如ELISA，只能测定实验结束时的蛋...
1-18 2022
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新品发布 | Welbuffer生物缓冲液-1分钟完成试剂配制缓冲溶液是指当加入少量强酸、强碱或稍加稀释时，能保持其pH值基本不变的溶液，它对强酸、强碱或稀释有一定的抵抗作用。由于缓冲溶液中同时含有较大量的弱酸（抗碱成分）和共轭碱（抗酸成分），它们通过弱酸解离平衡的移动以达到消耗掉外来的少量强酸、强碱，或对抗稍加稀释的作用，使溶液的H+离子或OH-离子浓度没有明显的变化，因此具有缓冲作用。用传统方法配制时需要计算、称量、混合并使用强酸碱调节pH，操作繁琐费时。月旭科技特推出Welbuffer缓冲速溶颗粒或片剂，能够解放您的双手，无需搅拌...
1-12 2022
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液相色谱，你问我答（十）“不同色谱柱和不同批次之间的重现性问：我要开始开发一个新的HPLC方法。验证之后，该方法将转道QC实验室并将使用许多年。我担心该方法的长期的重复性，特别是柱子的长期重复性。怎样才能确保好的重复性呢？答：首先，我要表扬你在开始做这个方法的时候就能考虑到这个方面。如果可以预料到该方法将要使用好几年，在选择柱子方面就要做些功课。要想使柱子在该方法的可预见的适用期内使用，就要选择一些大的生产厂家。另外，要选择一种标准的表面化学物质（比如C18或C8）而不是那些新奇的或很少使用的。下一...
1-11 2022
