技术文章
当前位置:
主页 >
技术文章 > 反相离子对色谱法建立的注意事项(二)
反相离子对色谱法建立的注意事项(二)
更新时间:2022-04-20 点击次数:1116
色谱柱:月旭Ultimate® XB C18(4.6×250,5μm)。
流动相:A相:磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钾6.8g/L,磷酸调整pH=2.5);
B相:甲醇/乙腈/四氢呋喃;
检测器:280nm;
柱温:30℃;
流速:1.0ml/min;
进样量:10μL;
样品溶剂:A相;
样品溶液:L-去甲肾上腺素、肾上腺素、L-酪氨酸、多巴胺用溶剂配置成浓度均为:0.2mg/mL。

B相:10%甲醇


讨论:在使用相似洗脱能力的有机相比例的情况下,同时检测L-去甲肾上腺素、肾上腺素、L-酪氨酸、多巴胺4种物质,常用的甲醇,乙腈,四氢呋喃三种有机溶剂具有不同的分离结果,可以根据表《溶剂的选择性特征》进行筛选。

讨论:针对于易解离的物质,不同的pH会导致物质的解离程度不一样,进而引起保留时间的差异,反相离子对色谱法中需要物质成为统一的解离状态。
