s-x3凝胶色谱属于液相色谱仪器,它是按被分析混合物不同组分分子大小的不同进行分离的,多用于高聚物的分析。它以液体做活动相,以多孔固体做固定相,其中孔是有一定尺寸限制的,而且大小不一。
s-x3凝胶色谱的重要参数
⑴柱体积:柱体积是指凝胶装柱后,从柱的底板到凝胶沉积表面的体积。在色谱柱中充满凝胶的部分称为凝胶床,因引柱体积又称“床”体积,常用Vt表示。
⑵外水体积:色谱柱内凝胶颗粒间隙,这部分体积称外水体积,亦称间隙体积,常用Vo表示
⑶内水体积:因为凝胶为三维网状结构,颗粒内部仍有空间,液体可进入颗粒内部,这就分间隙的总和为内水体积,又称定相体积,常用Vi表示。
不包括固体支持物的体积(Vg)。
⑷峰洗脱体积:是指被分离物质通过凝胶柱所需洗脱液有体积,常用Ve表示。当使用样品的体积很少时,(与洗脱体积比较可以忽略不计),在洗脱图中,从加样到峰顶位置所用洗脱液体积为Ve。当样品体积与洗脱体积比较不能忽略时,洗脱体积计算可以从样品体积的一半到峰顶位置。当样品很大时,洗脱体积计算可以从应用样品开始到洗脱峰升高的弯曲点(或半高处)。
s-x3凝胶色谱的选购
它的分离过程是在装有多孔固定相的色谱柱中进行的。当尺寸大小不同的分子通过色谱柱时,可占据的窨体积也不同。对活动相分子而言,填料孔的尺寸大得多,因些,活动相可以自由扩散出进;而大小不同的样品分子则要渗透到不同的孔中,较大的分子只能进进较大的孔中,较小的分子不仅能进进大孔、中孔,还能进进较小的孔。
因此,较小分子在柱内流经的路程和时间比大分子长得多,这样,当不同尺寸的高聚物分子流经多孔色谱柱时,大分子先被淋出,而小分子后淋出,因而高聚物分子便按照尺寸大小分开了,用检测器对其分别进行丈量就可以获得样品的组分信息。
s-x3凝胶色谱由溶剂贮存器、输液泵、进样器、色谱柱、检测记录系统以及一些附属电子仪器所组成。其中检测器又可以分为浓度检测器和分子量检测器。