用好
C18液相色谱柱的关键。
①经常冲洗色谱柱。每次使用后,必须用强溶剂冲洗30分钟左右,或者冲洗床体积(柱体积)的20倍左右。
②作者一般是将长期不用的色谱柱浸泡在甲醇中,效果很好。
③柱头必须拧紧,不许有任何缓冲液留在色谱柱内。
④在改变溶剂的组成时,有机溶剂和水之间的切换应该缓慢进行,如果快速变换,有可能损坏色谱柱。
⑤对于复杂体系的样品(如生物样品、中药样品)一定要进行预处理,或者在色谱柱和进样器之间加入保护柱。
⑥不能对一般色谱柱进行反冲洗,否则将迅速降低柱效;但是,色谱柱的生产者指明该色谱柱可以反冲洗时例外。
⑦不能受到强烈的机械振动;不能在压力和温度急剧变化的情况下使用,否则色谱柱内的填料会受到影晌。
C18液相色谱柱的维护:
a.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)。
b.pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围。
c.避免流动相组成及极性的剧烈变化。
d.流动相使用前必须经脱气和过滤处理。
e.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存于甲醇或乙腈中。
f.氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性,故使用时要注意,柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂,以避免腐蚀。