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色谱柱材料和配置的经验

更新时间:2018-07-16 点击次数:1259
可使用色谱柱清洗装置来将溶剂注入色谱柱中,溶剂冲洗装置会连接到有压力的气源,并把色谱柱插入到清洗装置中。把溶剂加入样品瓶中,然后使用气源对溶剂瓶回压。压力会强制溶剂流过色谱柱。残留物将溶解到溶剂中,并随溶剂反冲出色谱柱。然后将溶剂吹扫出色谱柱,并对色谱柱进行适当的老化。
 
色谱柱材料:
色谱柱管常采用内壁经过精密加工抛光的不锈钢管,以获得高柱效。不锈钢管耐溶剂、水和缓冲溶液的腐蚀,使用前色谱柱管先用、甲醇和水依次清洗,再用50%的hno3对柱内壁作钝化处理。钝化时使hno3在色谱柱管中至少滞留10min,以在柱内壁形成钝化的氧化物涂层。
色谱柱管也采用氟塑料、玻璃和玻璃衬里材料,主要是从抗腐蚀和易加工方面考虑。
 
色谱柱配置的经验
色谱柱可优先选择固定液分别为SE-30、OV-17、PEG-20M、DEGS、FFAP的柱子各一个。对于填充柱,担体可选白色担体、红色担体(包括未酸洗、酸洗、硅烷化)、GDX系列三种,基本可以解决工作中绝大部分项目。
对柱子长短的选择:由于分辨率与柱长的平方根成正比。柱子长,则提高分辨率。
一般来说:15m的短柱用于快速分离较简单的样品,也适于快速成分扫描分析;30m的色谱柱是常用的柱长,大多数分析在此长度的柱子上完成;50m、60m或更长的色谱柱用于分离比较复杂的样品。
对于口径的选择:柱径直接影响柱子的效率、保留特性和样品容量。小口径柱比大口径柱有更高柱效,但柱容量更小。
0.25mm:具有较高的柱效,柱容量较低。分离复杂样品较好。
0.32mm:柱效稍低于0.25mm的色谱柱,但柱容量约高60%。
0.53mm:具有类似于填充柱的柱容量,可用于分流进样,也可用于不分流进样,当柱容量是主要考虑因素时,选择大口径毛细管柱较为合适。专家认为,对于普通用户,可选30米或50米长的毛细管,口径选0.32mm较为便利。

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