液相色谱柱的平衡
液相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗液相色谱柱。确保分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。
每天用足够的时间以流动相来平衡液相色谱柱，就会在处理问题方面获得大的"补偿"，而且液相色谱柱的寿命也会变得更长。
液相色谱柱操作步骤：
a.平衡开始时将流速缓慢地提高，用流动相平衡液相色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂流速如果较低，则需要较长的时间来平衡）
b.如果使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡;分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。
液相色谱柱填料的选择
填料粒度
常用的填料颗粒度在3--10um之间，使用小粒径填料柱效高，但柱压也高，特别是使用含水量较大的甲醇流动相，由于水与甲醇之间形成氢键反应，粘度增大，柱压是不可忽视的因素，柱压高，很容易产生柱床层塌陷，降低柱子的使用寿命。如要追求高柱效，要用5um填料柱，推荐使用水一乙腈体系。
对于制备液相色谱柱，主要是追求制备量，而分离是次要的。一般选择粒径大于10um，廉价，且柱压小。
对于UHPLC，填料粒径较小，压力也较HPLC高很多。
B、不同内径的液相色谱柱均是分析型的，对于常规分析很适用。其使用流速为1ml/min，一般仪器均能匹配。柱效高、性能稳定、使用寿命较长。
C、液相色谱柱是半制备柱，分析条件可以移植分析柱的，普通液相色谱仪均可使用，可以得到少量纯度很高的组分，用于组分的定性及一些研究工作，是一种很实用的工具。
D、液相色谱柱是制备型液相柱，可制备大量的纯品组分，具有商业价值。目前，虽然价格较高，对于制药行业来讲，是必有的装备之一。重现性好，柱校更高、分离效果更好、分离时间更短。
