液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
液相色谱柱在实验过程中发现基线漂移的原因
1、柱温波动。
解决方法:控制好柱子和活动相的温度,检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱。
2、流通池被污染或有气体。
解决方法:用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要,可以用1N的硝酸。
3、紫外灯能量不足。
解决方法:更换新的紫外灯。
4、活动相污染、变质或由低品质溶剂配成。
解决方法:检查活动相的组成,使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂。
5、样品中有强保存的物质以馒头峰样被洗脱出,从而表现出一个逐步升高的基线。
解决方法:使用保护柱,如有必要,在进样之间。在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子。
6、检测器没有设定在吸收波优点。
解决方法:将波长调整至吸收波优点。
7、活动相的PH值没有调节好。
液相色谱柱漂移保存时间重现是液相性能好坏的一个重要标志,同一种东西,两次的保存时间相差不要超过15s,超过了半分钟可看做保存时间漂移,就无法进行定性,你要考虑以下原因:
1、温控不当。解决方法:调好柱温,检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱。
2、活动相比例变化。解决方法:检查四元泵的比例阀是否有故障。
3、色谱柱没有平衡。解决方法:在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱。
4、流速变化。解决方法:重新设定流速。
5、泵中有气泡。解决方法:从泵中除往气泡。