HILIC模式，大极性化合物的克星

工作中你是否会遇到一些C18柱难以保留的化合物？在前述文章中我们说到，部分不保留化合物可以通过加入离液剂来增加保留，但是离液剂也有一些无法解决的情况；我们可以通过离子对试剂来增加保留，但会改性色谱柱导致不可逆的损伤；还可以通过混合模式来保留，但色谱柱重现性相对不是很好……

那么，Hilic模式（hydrophilic interaction chromatography，亲水作用液相色谱）将是一个不错的选择。

Hilic模式是正交于反相与正相体系的一种模式，其固定相为极性，流动相则与反相系统相同；主要通过液液分配、吸附作用、离子作用、亲水作用等多种复杂的作用模式来让极性化合物保留，而并非单一的保留机制（反相体系主导作用力为疏水作用力）；极性化合物的保留及峰形同样取决于流动相的组成（pH、有机溶剂）及固定相的种类。在Hilic模式中，乙腈为弱洗脱溶剂，水是强洗脱溶剂，与正相类似，但为了区别，所以Hilic模式又称反反相。

在分离时，流动相中的极性溶剂在固定相表面形成一层极性层，而极性化合物由于液液分配等作用也会更倾向于极性层中而得以保留，因此极性溶剂在Hilic模式的流动相中添加量通常为3%--40%，低于3%则无法在固定相表面形成极性层，高于40%（有时可到50%）则会破坏这一分配平衡变为常规的反相模式。