高纯度RNase A纯化工艺方案分享

核糖核酸酶A

核糖核酸酶A（Ribonuclease A，缩写RNase A），是一种含4个二硫键的单链多肽，分子量约为13.7kDa（氨基酸序列）。RNase A是一种核糖核酸内切酶（endoribonuclease）。

核糖核酸酶层析纯化思路

提取及粗纯方案

我们基本采用牛胰腺硫酸铵盐析粗提物（由McDonald根据Kunitz氏纯化方法修改，“Methods in Enzymology"，Vol.ⅡP429，1955.）。

结论：

通过对牛胰腺盐析粗提物处理，上样CM Tanrose 6FF进行RNase A的分离纯化，其纯度得到了很大的提升，去除了较多的杂蛋白，经后续一定的处理后，跑SDS-PAGE胶，凝胶成像仪分析显示单一条带，符合纯化要求。