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稳定的pH环境在HPLC检测中的重要性

更新时间:2022-09-15 点击次数:831

在液相色谱中,经常会在流动相中加入缓冲溶液,其目的之一就是使整个HPLC系充处理一个稳定的化学环境,从而使检测具有更好的重现性。若系统的pH不够稳定,则会出现保留时间漂移,多次检测保留时间不能重现,多组分出峰顺序,峰组成不一致等等的各种问题。

特别是酸碱性成分的检测,pH值对其保留与峰型都有很大的影响,因此,这些成分检测时,HPLC系统的pH稳定性就非常的重要,需在流动相中加入相应的缓冲盐来保持系统的稳定性。例如我们平常使用的盐例如磷酸在1.5-3.5的pH范围内,有比较好的缓冲能力。

实例:

某成分原流动相仅使用冰醋酸调节pH值,但并未加缓冲盐体系,因HPLC系统的pH值不够稳定,而导致的样品检测时某一个峰产生漂移,多次实验,结果不能重现的问题。


图1:流动相中没有缓冲溶液,系统pH值不稳定

微信截图_20220915132401.png

在这个实例中,原流动相没有缓冲能力,pH值不稳定,将流动相替换成盐后,能提供稳定的缓冲能力,使各个物质到达较满意的分离,并具有比较好的重现性。

图2:在流动相中加入缓冲盐,使系统pH保持稳定

微信截图_20220915132407.png



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